WikiSysop le 20 juin 2014 à 15:23

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{{Article en travaux}}

=Synthèse de l'acide hippurique=
L'acide hippurique (également appelé acide benzoxyamidoéthanoïque) est obtenu par une réaction de N-acylation entre le groupe amino (-NH2) de la [[glycine]] et le [[chlorure de benzoyle]].

Cet acide, provenant de la métabolisation de composés aromatiques ne pouvant être détruits par l'organisme, se trouve dans les urines des herbivores. Lors d'un bilan hépatique (recherche de cirrhoses ou d'hépatites) une méthode d'examen consiste à faire ingérer au patient une certaine masse de [[benzoate de sodium]] que l'on retrouve dans les urines sous forme d'acide hippurique après un certain laps de temps. Il est également le signe d'une intoxication chronique ou aigüe au [[toluène]] {{sgh02}}{{sgh08}}{{sgh07}}<ref>La principale voie du métabolisme du toluène est celle de l’hydroxylation en alcool benzylique par la chaîne des enzymes de la famille du cytochrome P450. L'acide benzoïque est métabolisé soit en glucuronide de benzoyle ou en acide hippurique.</ref>

{{Précautions}}

* Le [[chlorure de benzoyle]] {{sgh05}} est corrosif et lacrymogène, il faut donc manipuler sous sorbonne en marche et en étant muni de gants épais.
* L'[[hydroxyde de sodium]] {{sgh05}} ainsi que l'[[acide chlorhydrique]] {{sgh05}} sont corrosifs, et l'acide chlorhydrique émet des vapeurs en quantité appréciable, le manipuler sous sorbonne.
* Le [[dichlorométhane]] {{sgh08}} est suspecté d'être cancérogène, il convient de le manipuler sous sorbonne en marche.
* Le [[cyclohexane]] {{sgh02}}{{sgh08}}{{sgh07}}{{sgh09}}, l'[[acétate d'éthyle]] {{sgh02}}{{sgh07}} sont inflammables et volatils, il convient de les manipuler sous sorbonne en marche loin de toute flamme ou source d'ignition.
* L'[[acide éthanoïque]] glacial {{sgh05}}{{sgh02}} est corrosif et inflammable, en plus d'avoir une odeur irritante et désagréable, on ouvrira la bouteille sous hotte aspirante.

==Matériel et produits==

* [[Chlorure de benzoyle]]
* [[Glycine]]
* [[Hydroxyde de sodium]] en solution aqueuse à 10%
* [[Dichlorométhane]] {{sgh08}}
* [[Acide chlorhydrique]] concentré
* [[Cyclohexane]] {{sgh02}}{{sgh08}}{{sgh07}}{{sgh09}}
* [[Acétate d'éthyle]] {{sgh02}}{{sgh07}}
* [[Acide éthanoïque]] glacial
* [[Ballon tricol]] de 250mL muni d'une agitation
* [[Ballon]] monocol de 100mL
* [[Réfrigérant]] de reflux
* [[Ampoule de coulée isobare]] de 50mL
* [[Chauffe-ballon]] à agitation magnétique de 250mL
* [[Fiole à filtrer]]
* Entonnoir [[Büchner]]
* [[Trompe à eau]] ou une [[pompe à vide]]

Plus tout le petit matériel susceptible d'être utilisé : entonnoir en verre, papier filtre, baguette en verre, balance de précision, boites de Petri ou verres de montre, etc...

==Mode opératoire==
{|border="1" align="center"
!align="center"|Composé||align="center"|Formule brute||align="center"|M (g/mol)||align="center"|Teneur/pureté||align="center"|Tfus. (°C)||align="center"|Téb. (°C)||align="center"|d420||align="center"|Dangers
|-
|[[Chlorure de benzoyle]]||C6H5COCl||140,57||99%||-1||198||1,553||{{sgh06}}{{sgh05}}
|-
|[[Glycine]]||C2H5NO2||75,07||98%||234||-||-||
|-
|[[Acide chlorhydrique]]||HCl||36.46||30%||-||-||-||{{sgh05}}
|-
|[[Acide hippurique]]||C9H9NO3||179,18||à recristalliser||187||240||-||
|-
|[[Dichlorométhane]]||CH2Cl2||84,93||99%||-95,1||40||1.42||{{sgh08}}
|}

*Equiper un tricol de 250mL d'un réfrigérant à reflux, d'un système d'agitation et d'une ampoule de coulée isobare.
*Introduire directement dans le ballon 60mL d'une solution de soude à 10% en masse et 5g de glycine. Mettre en route l'agitation afin de dissoudre la glycine. Il se produit la réaction suivante:
**H2N-CH2-COOH + HO- → H2N-CH2-COO- + H2O
*'''Sous hotte''' introduire avec précaution 9mL de chlorure de benzoyle dans l'ampoule de coulée isobare qui sera immédiatement bouchée.
*Sous vive agitation, ajouter lentement (15 minutes environ) le chlorure de benzoyle au contenu du ballon.
*A la fin de l'addition, laisser le mélange réactionnel sous agitation encore 10 minutes. Il se produits la réaction suivante:
**H2N-CH2-COO- + Ph-CO-Cl → Ph-CO-NH-CH2-CO-O- + (H+ + Cl-)
*Introduire 5g de glace pilée dans le ballon et ajouter doucement, par l'ampoule de coulée, 15mL d'acide chlorhydrique concentré en agitant. Il se produit la réaction suivante:
**Ph-CO-NH-CH2-CO-O- + H+ → Ph-CO-NH-CH2-COOH
*Refroidir dans un bain de glace.
*Filtrer le précipité sur [[Büchner]] et le laver avec 40 mL d'eau froide.
*Récupérer une pointe de spatule du produit pour une analyse chromatographique ultérieure. L'acide hippurique est contaminé par un peu d'[[acide benzoïque]].
*Placer le précipité dans un ballon de 100 mL surmonté d'un [[réfrigérant]] droit avec 30 mL de [[dichlorométhane]] et le porter à ébullition pendant 10 minutes.
*Verser le contenu du ballon dans un bécher propre et sec. Après refroidissement lent, filtrer sur [[Büchner]].
*Recristalliser l'acide hippurique brut dans de l'eau.
*Filtrer sur [[Büchner]], laver les cristaux avec 20 mL d'eau froide.
*Sécher a l'étuve réglée sur 130°C jusqu'à masse constante.

*Mesurer la température de fusion du produit obtenu.

Afin d'analyser sommairement l'efficacité de notre purification, nous allons réaliser une [[chromatographie sur couche mince]] en utilisant comme éluant un mélange 1/1 de [[cyclohexane]] {{sgh02}}{{sgh08}}{{sgh07}}{{sgh09}} et d'[[acétate d'éthyle]] {{sgh02}}{{sgh07}} et en ajoutant quelques gouttes d'[[acide éthanoïque]]. Nous utiliserons une plaque de gel de silice sur laquelle fera les dépôts suivants :
**'''1'''. solution d'acide hippurique brut à 1% dans l'[[éthanol]]
**'''2'''. solution d'acide hippurique pur à 1% dans l'[[éthanol]]
**'''3'''. solution d'[[acide benzoïque]] {{sgh08}}{{sgh05}} à 1% dans l'[[éthanol]]
**'''4'''. solution d'acide hippurique de référence à 1% l'[[éthanol]]

{{refs}}
*http://fr.wikipedia.org/wiki/Intoxication_au_tolu%C3%A8ne
*http://fr.wikipedia.org/wiki/Acide_hippurique
*http://www.inrs.fr/htm/acide_hippurique_urinaire.html
*http://training.itcilo.it/actrav_cdrom2/fr/osh/ic/nfrn1015.html

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